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用免疫分析法(糖化血紅蛋白單克隆抗體)檢測HbA1c

用免疫測定法分析HbA1c

一種典型的方法是對葡萄糖和β-鏈的前5-10個氨基酸使用特異性抗體(通常是單克隆抗體)。這種抗體是乳膠涂層的。還有一種凝集劑,它是一種合成聚合物,具有抗體靶向的HbA1c部分的多個拷貝。凝集劑與抗體反應(yīng)產(chǎn)生光散射和吸光度增加。

來自血液樣品的HbA1c然后與凝集劑競爭抗體膠乳結(jié)合位點,并因此減少光的散射和吸光度。所以血液中的HbA1c越大,散射光的吸光度越小。由此計算HbA1c的量,并且總血紅蛋白可以通過在血紅蛋白的Soret吸收帶處或附近(410-420nm)測量或通過在約540nm處通過Drabkins方法(氧化和轉(zhuǎn)化為氰化血紅蛋白)來測定,或者使用堿性血紅素試驗。

使用免疫測定程序的測定平臺包括:Siemens Healthcare Diagnostics DCA 2000和Advia 1650,Dimension,Roche Cobas和Hitachi以及Beckman分析儀。大多數(shù)對衰老或其他化學或自由基類型反應(yīng)產(chǎn)生的血紅蛋白反應(yīng)不會發(fā)生在HbA1c位點,而該方法組中的抗體所針對的位置是HbA1c位點。由于這個原因,這種類型的方法通常更容忍老化/降解反應(yīng),預計HbA1c對照比離子交換HPLC程序具有更長的可用重構(gòu)或開放瓶時間。

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